MMP-3 , Stromelysiini-1. Keuhkosyöpä, CPEB4

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29286212
Mikä on MMP-3?

MMP-3  Stromelysin-1

Substrates: 

• Aggrecan, gelatins, fibronectin, laminin, collagen III, IV, IX, X, large tenascin C, vitronectin (28,157,158,160,161)

MMP-3 mainitaan tuoreessa PubMed artikkelissa ( kts. linkki)  

Cell Biol Int. 2017 Dec 29. doi: 10.1002/cbin.10930. [Epub ahead of print]

Knockdown of CPEB4 expression suppresses cell migration and invasion via Akt pathway in non-small cell lung cancer.

Hu J¹, Zhang L¹, Chen Q¹, Lin J¹, Wang S¹, Liu R¹, Zhang W¹, Miao K¹, Shou T¹.

Tiivistelmä
Sytoplasmiseen polyadenylaatioelementtiin sitoutuva proteiini4 (CPEB4)  saattaisi olla tärkeä säätelijä monissa syövissä.  Kuitenkin  ei-pienisoluisissa keuhkosyövissä CPEB4:n biologinen funktio ja  sen taustalla piilevä molekulaarinen mekanismi ovat  edelleen tuntemattomia.  Tässä tutkimuksessa  selvitettiin ei-pienisoluisen syövän soluilla  CPEB4:n  osuutta metastaasissa.  siten, että  siRNA: ta käyttämällä hiljennettiin CPEB4 poistogeeniseksi . Käytettiin solumigraatiota ja invaasioita  sekä solukorjaantumsita selvittäviä menetelmiä ja vapaitten happiradiakaalien  kehkeytyminen määritettiin. proteiinin ilmenemä määritettiin.Käytettiin PI3K/akt-signaloinnin estoa.
Tulokset osoittivat, että CPEB4-poistogeenisyys esti  migraation ja invaasion ei-pienisoluisissa keuhkosyöpäsoluissa. Lisäksi CPEB4- poistogeenisyys vähensi Snail ja MMP-3 ilmenemää in vitro.  CPEB4 poistogeenisyys lisäsi vapaita happiradikaaleja.  CPEB4 hiljentäminen vähensi pAkt ilmenemää.
Yhteenvetona saadut tiedot osoittivat, että CPEB4 hiljentäminen indusoi vapaita happiradikaaleja, mikä vaimensi Akt-ilmenemää ja aiheutti lopulta ei-pienisoluisen keuhkosyövän invasoitumisen ja metastasoitumisen estymistä Akt-tievaikutuksen kautta.

Abstract

Cytoplasmic polyadenylation element binding protein 4 (CPEB4) could be an important regulator in variety of cancers. However, the biological function and the underlying molecular mechanism of CPEB4 in non-small cell lung cancer (NSCLC) remains unknown. In this study, we investigated the metastasis role of CPEB4 in NSCLC cells, we knocked down CPEB4 using siRNA. Transwell migration assay and cell invasion assay on Matrigel were presented, and cell migration was also determined by scratch-healing assay. ROS generation were determined by fluorescence probe DCFH2-DA. The protein expression was assessed by ELISA and western blot analysis. LY294002 were used to inhibit PI3K/Akt signaling. The data showed that knockdown of CPEB4 inhibited the migration and invasion of NSCLC. Moreover, silencing of CPEB4 reduced Snail and MMP-3 expression in vitro. We also indicated that CPEB4 knockdown increased the ROS expression. Furthermore, we found that silencing of CPEB4 decreased pAkt expression. Taken all together, our data demonstrated that silencing of CPEB4 induces ROS generation, thus suppressing the Akt expression, which finally prevents NSCLC cells invasion and migration. Therefore, CPEB4 may regard as a target to inhibit NSCLC invasion and metastasis through Akt pathway.

KEYWORDS:

CPEB4; Invasion; Migration; Non-small cell lung cancer

Lymen neuroborrelioosi ja liquorin MMP-kirjo

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=TIMP-1+in+Lyme+neuroborreliosis

J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2000 Mar;68(3):368-71.

Upregulation of matrix metalloproteinase-9 in the cerebrospinal fluid of patients with acute Lyme neuroborreliosis.Kirchner A¹, Koedel U, Fingerle V, Paul R, Wilske B, Pfister HW

Abstract

It was investigated
 (1) whether metalloproteinase-9 (MMP-9), MMP-3, and tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1 (TIMP-1, the natural tissue inhibitor of MMP-9) are increased in the CSF of patients with Lyme neuroborreliosis and
(2) whether macrophages can express MMP-9 when stimulated with Borrelia burgdorferi. Zymography showed MMP-9 activity in 26 of 31 (84%) CSF samples from patients with acute stage 2 Lyme neuroborreliosis, but not in 20 controls with non-inflammatory neurological disorders.

 Activity of MMP-2 was detected in all CSF samples in both patients with neuroborreliosis and controls, suggesting a constitutive release of MMP-2.

Using enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) MMP-3 (which can activate MMP-9) was detected in low concentrations in the CSF of 13 of 29 patients with neuroborreliosis, but not in controls.

TIMP-1 was increased twofold in CSF samples from patients with neuroborreliosis in comparison with the controls.

MMP-9 activity was induced in vitro in a mouse macrophage cell line (RAW 264.7) when stimulated with two different genospecies of B burgdorferi (B garinii, B afzelii ). This MMP-9 activity was reduced in a dose dependent manner when macrophages stimulated with B burgdorferi were coincubated with NF-kappaB SN50, a cell permeable peptide which inhibits the translocation of NF-kappaB into the nucleus of stimulated cells.

 The data show that (1) MMP-9 activity is present in the CSF of patients with neuroborreliosis,
 (2) macrophages stimulated with B burgdorferi are a possible source of MMP-9 increase, and
(3) activation of NF-kappaB may play a part in the upregulation of MMP-9 by B burgdorferi.

PMID:

10675223

PMCID:

PMC1736835

[Indexed for MEDLINE]

Free PMC Article

TAFI sammuttaa fibrinolyyttisen kaskadin. MMP-3 sulattaa XL-Fib.

http://www.jbc.org/content/271/28/16603.full.html
Trombiini ja trombomoduliini (TM) yhdessä  katalysoivat tehokkaammin TAFI:n aktivoitumista kuin trombiini yksinään, jopa 1250 kertaisesti, joten aktivoitunut TAFI , TAFIa   ( karboksypeptidaasi B tyyppinen antifibrinolyyttinen  tekijä)  pysäyttää  fibrinolyysiä XL-Fib vaiheessa.
Tämä on yksi  tapa typistää koagulaatiokaskadista  seuraavan  fibrinolyyttisen kaskadin  voimakkuutta ja täten  estää mahdollinen  MMP-kaskadin  alkava paisuminen plasmiiniaktiivaatiosta.

Entä XL-Fib?
Poikkisidoksin  linkkiytyneen  XL- fibriini pilkkoutuminen:
Se voi  vielä lysoitua täydellisesti, jos on MMP-3: a sopivasti. (siis  ilman plasmiiniakin)
MMP-3 tekee plasmiinista riippumattomalla tavalla
D- monomeerin kaltaisen fragmentti tulee, XL-Fb ja  DD-dimeeri
Fibrinogeenistä MMP-3 teki sellaisen muodon, josta trombiini ei pysty  tekemään hyytymää.
(Jos plasmiini aktivoituu, se  aiheuttaa epäspesifisemmän  tai laajakirjoisemman MMP-kskadin aktivoitumisen- arvelen)

Miten MMP-3 on paikalla? Onko  täysin terveellä MMP-3  havaittavissa  seerumissa?
 https://www.rug.nl/research/portal/files/2962360/c3.pdf
Löysin  useita  artikkeleita MMP-3 pitoisuuksista erilaisissa patologisissa tiloissa,   tässä on artikkeli  säteilyvauriosta. Kontrolleilla MMP-3 pitoisuus oli havaitsematonta tai hyvin matalaa ja sädetys aiheutti  MMP-3 nousua.  Jos  MMP-3 on  esim haavan paranemisprosessille tyypillinen,  on mahdollista että  sitä voi olla pieniä määriä, koska ihmiset joskus kolhi ja  altistuu kaikenlaiselle pienelle  naarmulle tai mustelmalle huomaamattaankin- mikä ei tarvitse plasmiinin aktivaatiota.  MMP-3 ei korreloi CRP:hen  ( akuuttifaasin proteiiniin),  niin isoon  tulehdustilaan.
---

LÄHDE: Biochemistry. 1996 Oct 8;35(40):13056-63.

Degradation of cross-linked fibrin by matrix metalloproteinase 3 (stromelysin 1): hydrolysis of the gamma Gly 404-Ala 405 peptide bond.

Bini A¹, Itoh Y, Kudryk BJ, Nagase H.

Abstract

Matrix metalloproteinases (MMPs) can degrade a number of proteins that constitute the extracellular matrix. Previous studies have shown that atherosclerotic plaques contain substantial amounts of fibrin(ogen)-related antigen, and more recently, MMPs have been identified in such lesions. The hypothesis that MMPs play a role in the degradation of fibrinogen (Fg) and cross-linked fibrin (XL-Fb) was investigated.

 Fibrinogen became thrombin-unclottable when treated with matrix metalloproteinase 3 (MMP-3, stromelysin 1) but not with matrix metalloproteinase 2 (MMP-2, gelatinase A).
 Incubation of XL-Fb clots (made with 125I-Fg) with MMP-3 resulted in complete lysis after 24 h.
A D monomer-like fragment was generated by MMP-3 degradation of fibrinogen, XL-Fb, and fragment DD. Immunoreactivity with monoclonal antibody (MoAb)/4-2 (anti-gamma 392-406) but not with MoAb/4A5 (anti-gamma 397-411) suggested that a major cleavage site was within the sequence participating in the cross-linking of two gamma-chains.
NH2-terminal sequence analysis of they gamma-chain of the D monomer-like fragment and of a dipeptide isolated from the MMP-3 digest of XL-fibrin identified the hydrolysis of the gamma Gly 404-Ala 405 peptide bond.
 These data indicate that the degradation of Fg and XL-Fb by MMP-3 is specific and different from plasmin.
This mechanism of fibrinolysis might be of relevance in wound healing, inflammation, atherosclerosis, and other pathophysiological processes.

PMID:8855941 [PubMed - indexed for MEDLINE] 

 

Miten sitten päikan päällä olisi sopivasti pieni määrä spesifistä MMP-3 stromelysiiniä  siivamassa  lkinkkiytynyttä fibrinogeeniä? -  ilman että MMP-kaskadi lähtee käyntiin ja että hyytymsikaskadi  typistyy  heti sopivasti tarpeeksi ajoissa.  

 

(Kaikkeen  metaboliaan pitää  suhteuttaa ihmisen liikkumisfaktori- se saattaa olla  koneiston normalisaattoritekijä, joka on essentielli- ja kaikissa kaavoissa  näkymätön tekijä. 

On kaikenlaista  modulia, proteosomi, degradomi, metabolomi, Pitäisi olla myös lokomotiomi lisätiedoin    sen aiheuttamien  metabolisten  reaktioiden nuolensuuntavaihdokset- gastronomin vaikutuksetkin  ovat   mekittävät)

Suuren vitamiini K2-lisän vaikutus nivelreuman ja luuston merkitsijöihin kuten MMP-3 ja CRP

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23124653 
 Ebina K, Shi K, Hirao M, et al.
itamin K2 administration is associated with decreased disease activity in patients with rheumatoid arthritis.Mod Rheumatol. 2012 Nov 6.V Department of Orthopaedics, Osaka University Graduate School of Medicine, 2-2 Yamadaoka, Suita, Osaka, 565-0871, Japan.

TIIVISTELMÄ(Suomennosta)

• Vitamiini K2 ( menakinoni; MK-n) on mainittu luun  osteoblastien  mineralisoitumisen ja osteoklastien apoptoosin yhteydessä, mutta myöskin  siinä apoptoosissa, mitä tapahtuu nivelreuman synoviaalisissa soluissa, vaikka K2 vitamiinin  kliininen teho nivelreumasairauden aktiivisuuteen onkin pysynyt  tuntemattomana. Tässä työssä tutkittiin  158 naispuoliselta reumapotilaalta ( keski-ikä 62.5 v)  K2 vitamiinivaikutuksia. Poissuljettiin ne, jotka saivat warfariinia, "biologics" tai teriparatidiä. 

 Päivittäinen vitamiini K2-annos oli  45 mg. 70:lle  potilaalle, joiden seerurumin ucOC  pitoisuudet  olivat yli 4,5 nanogramma/ml tai joilla BMD oli alentunut huolimatta muista  anti-osteoporoottisista lääkityksistä- katsomatta tässä reuman aktiivisuutta ollenkaan. 

Suoritettiin longitudinaalinen  (3 kk) tutkimus 52:lle potilaalle joille annettiin K2 vitamiinia muuttamatta ollenkaan heidän muita lääkkeitään

. VitK2 (45 mg/day) was administered in 70 patients with a serum undercarboxylated osteocalcin (ucOC) level of > 4.5 ng/ml or with decreased bone mineral density (BMD)  in spite of the treatment with other anti-osteoporosis medications, regardless of RA disease activity. A longitudinal study was conducted in 52 patients who were additionally treated with VitK2 without changing their other medications for three months.

 Poikkileikkaustutkimuksessa vertailtiin Vit K2-lisätöntä ryhmää (  n= 88) ja vitamiini K2 lisää saaneita ( N= 70) ja havaittiin, että K2-vitamiini lisän saaneilla oli  seuraavat matalammat arvot : seerumin CRP oli matalampi, samoin MMP-3 ja DAS28-CRP..
 3 kk seurantatutkimuksessa K2 vitamiinilisää saaneilla potilailla oli merkitsevästi laskenut CRP, MMP-3 ja DAS- CRP.

Johtopäätöksenä:
 Vitamiini K2 saattaa parantaa taudin aktiivisuuden  antaman  laboratorio-profiilin  ja  oireita osteoporoosin ohella  nivelreumataudin oireita..
VitK2 may have the potential to improve disease activity besides osteoporosis in RA.

KOMMENTTI:
Japanin kansallisruoka natto, fermentoitu soija, antaa paljon  erilaisia K2 vitamiineja. 
Keho tuotaa  K2 vitamiinia  orgaanispesifisesti  aktiivisti imeytyvästä K1 vitamiinista käsin.
 Paras K1 vitamiini ssadaan vihreistä vihanneksista ja kasvisöljyistä  suun kauta otettuna. siis ruokana., jolloin se siirtyy imuteitse periferiaan  rasvan mukana ja sitten  myöhemmin maksaan lisäsynteeseihin. Maksa itse tuottaa runsaasti pitkäketjuisia menakinoneja (MK-n)  kuten luusto.  Aivot tuottavat paikallista suht lyhytsivuketjuista   MK-4 tyyppiä 
Tietyisssä ruoissa  on menakinoneja kuten juustossa. Menakinonit imeytyvät passiivisti suolistosta. ja kulkeutuvat maksaan. Suolistobakteerit valmistavat myös menakinoneja ja ubikinoneja käyttäessään kuituja. Ne auttavat  bakteerien oman energian saamista.
K2 vitamiinin osuus ei ole niin tarkasti hahmotettu kuin K1 vitamiinin osuus. Tiedetään että K-vitamiinin tuma ( metylnaftokinoni) ilman sivuketjua on xenobioottinen ja erittyy kehosta nopeasti.
Tässä tutkimuksessa käytetty K2  annos on suuri, farmakologinen.
Päivitys 19.4. 2014

Metastasiini S100A4, Surviviini, Flt3, MMP-3 reumatologian alalla (M Erlandssonin väitöskirja nivelreumasta

M. Erlandssonin  väitöskirja  Göteborgissa.
http://rheumatology.oxfordjournals.org/content/early/2012/01/17/rheumatology.ker362.full
Erlandsson MC, Forslind K et al.  Metastasin S100A4 is increased in proportion to radiographic damage in patients with RA.
Rheumatology (Oxford). 2012 May;51(5):932-40. doi: 10.1093/rheumatology/ker362. Epub 2012 Jan 17.

 Department of Rheumatology and Inflammation Research,  Göteborg, Sweden.

 

 MAHDOLLISESTA UUDESTA  MARKÖÖRISTÄ  S100A4
Metastasiinin S100A4  määrittäminen nivelreuman  mahdollisena biologisena merkitsijänä

Tässä väitöstyössä tutkija selvittää, olisiko  metastasiinilla   merkitsijän arvoa nivelreumassa. Tutkittiin nivelreumapotilaita (N= 87) . Heillä oli ollut reumaa 2-44 vuotta. He olivat saaneet metotrexaattia ja infliximabia. Reumakuvat käsistä ja jaloista  oli otettu.
 S100A4 pitoisuudet analysoitiin  suhteessa 
röntgenologisiin reumamuutoksiin ,
reuman  kliinisen  aktiivisuuteen (DAS-28),
tulehdukseen ( IL-6, CRP, ESR),
 luun ja ruston merkitsijöihin (MMP-3 (Stromelysiini-1),
COMP,
I-tyypin kollageenin C-telopeptidiin  CTX-1)
 ja proto-onkogeeneihin kuten IGF-1 ja Flt3 ligandi.

Tuloksista:
S100A4:n korkeat pitoisuudet assosioituivat vaikeisiin röntgenologisiin reumamuutosmerkkeihin,
 infliximabille  vastaamattomuuteen,  infliximabivasta-aineitten esiintymiseen,  ja  korkeaan Flt3 ligandi-pitoisuuteen.

 Korkea S100A4 lukema  oli ennusteinen  infliximabihoidon  aikaiselle röntgenologiselle progredioitumiselle (pahenemiselle). Matalat S100A4 pitoisuudet liittyivät   hyvään  infliximabivasteeseen, kliiniseen  remissioon ja negatiiviseen reumatekijään RF.
S100A4 omasi korrelaatiota   surviviini tekijään (survivin, Survival-factor)).

Siis S100A4 pitoisuuksien nousu on suhteessa röntgenologisiin vaurioihin ja niiden pahenemisiin niverlreumassa. Havainto korrelaatiosta S100A4 ja surviviinin sekä Flt3 ligandin kesken viittaa siihen, että nämä proteiinit edustavat uutta merkitsijöitten ryhmää ( cluster), jotka  ovat  antavat prognoosia nivelreumapotilaan röntgenologisesta  pahenemisesta ja  huonosta vasteesta

 The finding of a correlation between S100A4 and survivin and Flt3 ligand suggests that these proteins may represent a new cluster of biomarkers predicting radiographic progression and poor treatment response in RA patients.

Päivitys 19.4. 2014 

X. kansainvälinen keliakiakonferenssi.Hoitamattoman keliakian metalloproteinaasit ovat MMP-1 ja MMP-3.

 Hoitamattomassa keliakiassa lisääntyvät  subepiteliaalisen kerroksen MMP-1 ( kollagenaasi)  ja MMP-3, joka on stromelysiini -1.
Olen ollut Keliakiasymposiumissa ja kansainvälisessä konferenssissa 1996 ja 1998 kun ne olivat Tampereella  ja tiedän että osallistujat  maksettuaan hyvän osallistumismaksun saavat  tiiviisti kirjoitetun kirjan  mukaansa. Kirjassa on jokainen posterikin mainittu. Nyt on  tällainen kirja annettu niille, jotka osllaistuivat symposiumiin  2002   ja siinä näyttää olevan kiinnostava kohta  MMP proteinaaseistakin.


http://books.google.se/books?id=79w8KnDoptgC&pg=PA113&lpg=PA113&dq=metalloproteinases+in+++enterocyte&source=bl&ots=GGAHFfsHXK&sig=an-A7GdXqMRmJC_PrRtbk6_8kDs&hl=sv&ei=jGO9TbzcK8Trsga7mfTyBQ&sa=X&oi=book_result&ct=result&resnum=3&ved=0CDIQ6AEwAg#v=onepage&q=metalloproteinases%20in%20%20%20enterocyte&f=false

•  Tieto: MMP-1 ja MMP-3 expressio lisääntyy hoitamattomassa keliakiassa subepiteliaalisessa kerroksessa. 

Coeliac Disease: Proceedings of the Xth International Symposium on Coeliac Disease Paris, Jun 2-5, 2002

N. Cerf-Bensussan

John Libbey Eurotext, 2003 - 300 sidor

0 Recensioner

Proceeding of the 10th International Symposium. Coeliac disease is again in front of the stage. After the advent of intestinal biopsy in clinical practice in the early sixties and during the following years, coeliac disease gained its status of a disease exemplary of the immune reaction of the gut mucosa to food antigens. During the following 10-15 years coeliac disease vanished behind progresses in mucosal immunology, and in the molecular biology of HLA molecules. The last years have seen the transformation of coeliac disease, from a rare and serious malabsorption syndrome into a polymorphic condition, the "coeliac iceberg" the immersed part of which now raises important public health issues. Regular International Symposium witness the development of our knowledge concerning coeliac disease. The last International Symposium on coeliac disease took place in Paris, at the Pasteur Institute in June 2-5, 2002. Its aim was to equally underline the major progresses made during the recent years in epidemiology, the genetics, the pathophysiology of the intestinal lesions and in the serological methods of diagnosis, the new clinical aspects of the disease and the more accurate evaluation of the risk of cancer, lesser than previously estimated. We hope that these proceeding will fulfil the expectations of all those, scientists as well as clinicians, paediatricians or adult gastroenterologists, who wish to update their knowledge on coeliac disease, this old but still stimulating lady of gastroenterology.

Mer »

Nikotiinin ja LPS:n vaikutus MMPs ja tPA. pitoisuuksiin

 Nikotiinin ja hammasjuuribakteerin  LPS rakenteen  vaikutus matrixmetalloproteiiniin ja kudoksen plasminogeeniaktivaattoriin TPA ja niiden inhibiittoreihin   ihmisen ostoéoblasteissa.
Nicotine and LPS increase MMPs and tPA

LÄHDE: Suomennan myöhemmin. MMP- kudosta sorvaavia proteiineja rauhoittavia tekijöitä ei ole monta, mutta Green tea on yksi niitä löydettyjä molekyylejä.

Katono T, Kawato Effects of nicotine and lipopolysaccharide on the expression of matrix metalloproteinases, plasminogen activators, and their inhibitors in human osteoblasts.Arch Oral Biol. 2009 Feb;54(2):146-55. Epub 2008 Nov 4.

• Tiedetään, että periodontiittibakteerin LPS voi aloitaa alveolaarisen luukadon indusoimalla potilaan sytokiineja.  Tupakanpoltto  lisää  periodontiitin riskejä ja vaikeuttaa  tätä tulehdusta. 

OBJECTIVE: Lipopolysaccharide (LPS) from periodontopathic bacteria can initiate alveolar bone loss through the induction of host-derived cytokines. Smoking increases the risk and severity of periodontitis. 

• Tutkijat tarkkailivat luusolusta , osteoblastista, nikotiinin ja bakteeritekijän(LPS) vaikutuksia seuraaviin  proteiineihin:ja niiden geenien  ilmentymiseen

matrixmetalloproteiinit, MMP,

MMP estäjät, TIMP

 plasminogeenin aktivaattorit (PA) 

PA estäjät PAI-1

Myös PGE(2) eikosanoidin tuotto katsottiin.  

We examined the effects of nicotine and LPS on the expression of matrix metalloproteinases (MMPs), plasminogen activators (PAs), and their inhibitors, including tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMPs) and PA inhibitor-1 (PAI-1), in osteoblasts. 

Tutkimuksissa käytettyjä aineita:  polymyxin B, d-tubocurarine, NS398, Celecoxib.

METHODS: The cells were cultured with or without 10(-4) M nicotine and 100 ng/ml LPS for 12 days or with 100 microg/ml polymyxin B, 10(-4) M D-tubocurarine, 10 micromol/ml NS398, or 10(-6) M celecoxib in the presence of either nicotine or LPS for 12 days. The gene and protein expression levels for MMPs, PAs, TIMPs, and PAI-1 were examined using real-time PCR and ELISAs, respectively. PGE(2) production was determined using an ELISA. 

•  Tuloksista:  Nikotiinin tai bakteeritekijän lisääminen luusoluun nosti siinä seuraavien proteiinien ilmentymisen: MMP-1, MMP-2, MMP-3, kudostyyöpinen PA ( tPA).
•  Seuraavien proteiinine määrät laskivat: TIMP-1, TIMP-3 ja TIMP-4.
• Seuraaviin proteiineihin ei näkynyt olevan vaikutusta: TIMP-2 ja PAI-1

RESULTS: The addition of nicotine and/or LPS to the culture medium increased the expression of MMP-1, -2, and -3 and tissue-type PA (tPA); decreased the expression of TIMP-1, -3, and -4; and did not affect expression of TIMP-2 or PAI-1. 

• Jos läsnä oli d-tubokurariinia tai Polymyxin B antibioottia, niin nikotiini tai bakteerin LPS ei stimuloinut MMP-1 proteiinia lisääntymään. 
• Jos läsnä oli NS398 tai celecoxib anti-inflammatorinen lääke, oli  bakteeriaineksen LPS ja nikotiinin  stimuloiva vaikutus MMP_1 proteiinin suhteen aivan samanlaista, muta  eikosanoidia PGE(2) ei  tuottunut.  

In the presence of d-tubocurarine or polymyxin B, neither nicotine nor LPS stimulated the expression of MMP-1. In the presence of NS398 or celecoxib, the stimulatory effects of nicotine and LPS on MMP-1 expression were unchanged, but they were unable to stimulate PGE(2) production.

• Mitä tutkijat pystyivät päättelemään saamistaan tuloksista?  He arvelevat, että nikotiini ja hammasbakteerimateriaali stimuloivat luun resorboitumista ( katoamista) osteoidin turnover  eli kudosvaihtuvuusvaiheen aikana  lisäämällä  matrixmetalloproteinaasien (MMP)  ja  tPA:n tuottumista ja vähentämällä matrixproteiinien inhibiittorien  (TIMP)  tuottumista.  Lisäksi he ovat sitä mieltä, että  nikotiinin ja hammasbakteerimateriaalin stimuloiva vaikutus  eikosanoidin prostaglandiinin PGE(2) tuotantoon  on itsenäinen tapahtuma, joka ei riipu  niiden stimuloivasta vaikutuksesta MMP_1 ilmenemiseen. 

CONCLUSION: These results suggest that nicotine and LPS stimulate the resorption process that occurs during turnover of osteoid by increasing the production of MMPs and tPA and by decreasing the production of TIMPs. Furthermore, they suggest that the stimulatory effect of nicotine and LPS on PGE(2) production is independent of their stimulatory effect on MMP-1 expression.